Se evaluó la producción del cultivo del hongo comestible Pleurotus ostreatus usando tres tipos de tamaño de partícula de guadua como sustrato (Garzón y Henao, 2008), denominados láminas, astillas y aserrín, los cuales fueron esterilizados y depositados en bolsas de polietileno con la semilla. Al sustrato tipo astillas y aserrín se consideraron los parámetros de colonización, fructificación, cosecha, precocidad, rendimiento medio, eficiencia biológica media y pérdidas del proceso en la evaluación de la producción; para el sustrato tipo láminas no se presentaron los parámetros anteriores debido a que este sustrato no presentó crecimiento micelial. Los resultados para el sustrato tipo aserrín indicaron buenos periodos de colonización y fructificación, un rendimiento medio de 9,2%, una eficiencia biológica de 9,2%, precocidad de 26 días, y no se presentaron pérdidas en el proceso; el sustrato tipo astillas presentó una colonización y fructificación tardías, un rendimiento medio de 13,31%, una eficiencia biológica de 15,6%, precocidad de 84 días y una pérdida en el proceso de 25%.